UPLC-MS/MS方法是常規、高通量測定生物單胺以診斷分泌兒茶酚胺的腫瘤的金標準。但是，如果不采用有效的樣品預處理方法就無法實現這一目標。因此，本研究開發了薄膜固相微萃取（TF-SPME）和填充纖維固相萃取（PFSPE）兩種預處理方法，并對其分析尿液中生物單胺及其代謝產物的性能進行了評估。選擇親水親脂平衡（HLB）涂層作為薄膜葉片式SPME方法的吸附劑，并與聚氯醚（PCE）復合納米纖維作為PFSPE方法的吸附劑進行了比較。在最佳條件下，新開發的TF-SPME方法的絕對提取回收率和相對基質效應分別為35.7-74.8％和0.47-3.63％。去甲腎上腺素、腎上腺素、多巴胺、去甲變腎上腺素3-甲氧酪胺、血清素、組胺的線性范圍為0.25-500ng/mL，而變腎上腺素的線性范圍為0.1-500ng/mL。TF-SPME的批內和批間變異系數為0.7-8.7％，對應的準確度經計算為90.8-104.7％和89.5-104.5％。與PFSPE方法相比，TF-SPME方法對8種目標物質具有更高的提取效率、更低的基質效應和更寬的線性范圍，從而確保了同時檢測所有目標化合物的更高準確性。因此，本研究所提出的TF-SPME方法可通過一次同時定量尿液中的8種生物單胺類，以實現對常規臨床背景和其他相關研究中的神經內分泌腫瘤的高通量篩查。
圖1.（A）HLB TF-SPME涂層（5μm顆粒）的SEM圖像，使用2000x的放大倍率；（B）HLB-WAX TF-SPME涂層（5μm顆粒）的SEM圖像，使用12570x的放大倍率；（C）WCX-oasis TF-SPME涂層的SEM圖像，使用2550x的放大倍率；（D）PCE TF-SPME涂層的SEM圖像，使用13350x的放大倍率；（E）PS/PCE復合納米纖維的SEM圖像，使用3960x的放大倍率；（F）PS/PCE復合納米纖維的SEM圖像，使用15940x的放大倍率。
圖2.萃取相的選擇：（A）當存在絡合劑時，對萃取生物單胺的萃取相進行評估以及（B）當不存在絡合劑時使用HLB萃取生物單胺。
圖3.比較解吸到四種測試溶劑混合物中的生物單胺數量。使用HLB涂層對生物單胺濃度為100ng/mL的1000μL PBS進行萃取，持續60分鐘。將葉片解吸到200μL溶劑中。
圖4.目標生物單胺的提取時間（A）和解吸時間（B）圖。用加有50ng/mL MN、5-HT、NMN、E、DA、NE、3-MT和組胺的PBS稀釋的空白尿液進行萃取。
圖5.測定目標生物單胺的洗滌時間優化。從摻有20ng/mL IS的真實尿液中提取。
圖6.DPBA量對提取目標生物單胺的影響。
圖7.使用PFSPE和TF-SPME-HLB的相同尿液樣品的結果比較。
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