DOI: 10.1039/d0ra06305c
為了開發具有生物因子局部緩釋功能以促進骨缺損修復的生物復合材料，采用同軸靜電紡絲技術制備了含有超活性血小板裂解物（sPL）的明膠/PCL/PLLA同軸納米纖維支架。利用掃描電子顯微鏡（SEM）觀察到納米纖維呈均勻的無珠圓形形態，通過透射電子顯微鏡（TEM）證實了納米纖維的核/殼結構。用親水性明膠和疏水性L-聚乳酸包裹聚己內酯和sPL的混合物可以連續釋放生物活性因子長達40天。sPL的封裝可增強細胞粘附和增殖，而sPL的負載可以促進成骨細胞的成骨作用。此外，體內研究表明，sPL負載生物復合材料能夠促進大鼠顱骨缺損的修復。因此，研究結果表明，sPL負載核殼納米纖維可為該支架在骨組織工程中的臨床應用增加巨大的潛力。
圖1.（A）不同濃度sPL材料的SEM圖像。（a）S1，（b）S2，（c）S3，（d）S4，（e）S5，（f）不同材料的纖維直徑；（B）通過TEM顯示了納米纖維的同軸結構；（C）負載sPL復合材料支架的孔隙率；數據表示為平均值±SD（n=3）。與S1相比，***P<0.001，****P<0.0001；與S2相比，###P<0.001，####P<0.0001。
圖2.（A）：同軸電紡納米纖維的水接觸角；（B）與血液接觸后同軸電紡納米纖維的吸光度；（C）VEGF生長因子的累積釋放曲線；（D）IGF生長因子的累積釋放曲線；（E）在不同支架上培養1、3和7天后，通過CCK-8方法檢測到的成骨細胞的增殖活性。（F）培養4和8小時后粘附的成骨細胞的數量。與S0相比，所有數據均標記為平均值±標準偏差，n=6，**P<0.01，***P<0.001，****P<0.0001。
圖3.通過SEM觀察3和14天后細胞與sPL三維纖維支架共培養的情況。
圖4.（A）細胞和納米纖維培養7天和14天后的ALP活性，（B）細胞和納米纖維培養7天后的ALP活性，PCR測定OPN，OCN，ALP，RUNx2活性。所有數據均標記為平均值±標準偏差，n=6，**P<0.01，***P<0.001。
圖5.在術后第4和第8周對材料治療組和對照組的顱骨缺損進行了掃描。新骨組織充滿了sPL-NFS覆蓋的顱骨缺損。術后第4周在其他材料組中未觀察到缺損。S4材料組可見骨缺損，另一組骨缺損變小。術后8周，修復了所有骨缺損，將整個顱骨缺損置于S4骨組織內，以找到明顯的骨缺損部位。重建愈傷組織，并與未處理部位的骨表面齊平。
圖6.在術后4周和8周對樣本進行HE染色處理。S4組缺損區域形成骨贅，在其他材料處理組和對照組的缺損區域發現少量肉芽組織。
圖7.在術后4周和8周對樣本進行Masson染色處理。S4組缺損區域形成骨贅，在其他材料處理組和對照組的缺損區域僅發現纖維組織。
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