DOI: 10.1002/jbm.a.36962
生長因子（GF）遞送是脊髓損傷修復的常見策略，但是，GF的降解會阻礙長期治療。眾所周知，通過肝素隔離GF可以保護遞送后的生物活性。研究者測試了兩種肝素修飾物，甲基丙烯酸肝素和巰基化肝素，并與甲基丙烯酸透明質酸（MeHA）進行靜電紡絲形成了HepMAHA和HepSHHA納米纖維。對于負載條件，將MeHA、HepMAHA和HepSHHA纖維與可溶性bFGF或NGF孵育，并用PBS沖洗。對照組在PBS中水合。在生長培養基或補充bFGF的培養基中培養24小時后，分析了L929成纖維細胞的增殖情況。在無血清培養基（SFM）或補充NGF的SFM（SFM+NGF）中培養三天后，測量解離的雞背根神經節神經突。在生長培養基中，與其他組相比，負載的HepMAHA中成纖維細胞增殖顯著增加（α<0.05）。在SFM中，與所有其他組相比，負載的HepMAHA的平均神經突長度最長。在SFM+NGF中，與MeHA相比，HepMAHA和HepSHHA的神經突長度增加，無論負載量如何（α<0.01），這表明可溶性NGF的主動隔離。HepMAHA是一種在脊髓損傷環境中隔離釋放GFs的有希望的生物材料，并且可以與GF填充的微球結合用于未來研究。
圖1：電紡納米纖維的掃描電子顯微照片。A：MeHA，B：HepMAHA，C：HepSHHA。比例尺為10μm。顯微照片顯示，在不同類型的纖維中，具有類似結構的平滑定向納米纖維。D：顯示納米纖維濃度的表格。顯示三種纖維類型的納米纖維排列和纖維直徑。纖維排列是指在30度范圍內的纖維百分比，其中發現了纖維百分比最高的頻帶。纖維直徑是平均值±標準偏差。N=5個SEM圖像。（縮寫：納米，nm）
圖2：在存在肝素修飾納米纖維的情況下，L929成纖維細胞的增殖，以alamarBlue的百分比減少表示；隨著細胞的增殖，alamarBlue試劑會減少，據報道可近似于細胞增殖。將負載的纖維暴露于100 ng/ml bFGF，然后在細胞培養之前用PBS漂洗7次。黑色誤差條表示標準偏差。A：在生長培養基中，負載的HepMAHA與所有其他條件顯著不同（*，p<0.05）。B：在補充FGF的培養基中，負載的HepMAHA與負載的HepSHHA顯著不同（$，p<0.05）。
圖3：在存在肝素修飾納米纖維的情況下，用A：SFM和B：SFM+NGF培養的平均神經突長度。將負載的纖維暴露于100 ng/ml NGF，然后在細胞培養之前用PBS漂洗7次。誤差條表示標準偏差。*表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與所有其他條件顯著不同（p<0.01）。＃表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與負載的MeHA顯著不同（p<0.01）。$表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與負載的HepSHHA顯著不同（p<0.01）。+表示肝素-透明質酸的生長因子隔離條件與負載的HepMAHA顯著不同（p<0.01）。
圖4：抗神經絲和FITC顯示的纖維上的突起延伸示例。所有圖像都遵循右上角的100μm比例尺。A至F是在SFM中生長的神經突。G到L是在SFM+NGF中生長的神經突。神經突在MeHA（A，G）、HepMAHA（B，H）、HepSHHA（C，I）、負載的MeHA（D，J）、負載的HepMAHA（E，K）、負載的HepSHHA（F，L）上生長。
微信二維碼
