DOI: 10.1039/x0xx00000x
抗生素耐藥菌的日益普遍需要快速識別和有效的銷毀方法。本研究提出利用電紡纖維墊和聚集誘導發射(AIE)探針衍生的試紙,用于痕量感測并破壞抗藥性大腸桿菌。將適體綴合在纖維上以選擇性捕獲大腸桿菌,并且可以通過用鹽溶液沖洗來恢復捕獲能力。羥基四苯乙烯(TPE)與兩種頭孢菌素分子連接構建TPE-Cep探針,在β-內酰胺酶存在下特異性地開啟熒光發射,是篩選耐藥菌的關鍵標記。纖維墊只有在抗生素耐藥菌存在下才會發光,熒光強度的變化在統計學上可以擬合成定量分析方程。纖維條顯示從藍色到綠色的明顯顏色變化,以便直觀地讀出細菌水平,并且檢測限(LOD)遠低于之前的紙張基底。此外,TPE-Cep探針可以在室內光照下產生活性氧(ROS)以殺滅捕獲的細菌。因此,適體接枝電紡纖維與功能性AIE探針的結合為抗生素耐藥菌的選擇性捕獲、痕量成像和光動力破壞提供了可能。
圖1.(a)TPE-Cep的合成路線。(b)TPE-GCLE和(c)TPE-Cep的1H NMR光譜。(d)TPE-GCLE在高達99%不同含水率的DMSO/水混合物中的熒光光譜。(e)在不同含水率的DMSO/水混合物中孵育后,TPE-GCLE在466 nm處的熒光強度變化(n=3)。
圖2.(a)TPE-Cep在PBS中和β-內酰胺酶存在下的熒光光譜。插圖是使用手持式紫外線燈照明下溶液的照片。(b)在不同濃度的PCA和青霉素存在下,TPE-Cep與β-內酰胺酶孵育后的熒光強度(n=3)。(c)在β-內酰胺酶、BSA、胰蛋白酶、溶菌酶、酯酶、葡萄糖、CaCl2和CuSO4存在的情況下,TPE-Cep探針的熒光強度(n=3)。
圖3.(a)電紡PSMA/PS和Apt-g-PSMA/PS纖維的典型SEM圖像和(b)XPS光譜。(c)具有不同PSMA組分的纖維表面的酸酐基團和適體的密度(n=3)。
圖4.(a)與105 CFU/mL大腸桿菌/pUC19孵育長達60分鐘后的細菌捕獲量(n=3)。(b)與105 CFU/mL大腸桿菌/pUC19孵育50分鐘后,不同PSMA組分的纖維對細菌的捕獲量(n=3)。(c)細菌捕獲的纖維氈的典型SEM形態。箭頭指示捕獲的細菌。(d)與105 CFU/mL大腸桿菌/pUC19、大腸桿菌、表皮葡萄球菌和銅綠假單胞菌孵育50分鐘后的細菌捕獲量(n=3)。
圖5.(a)與TPE-Cep探針孵育后,在纖維上捕獲的大腸桿菌/pUC19、大腸桿菌、表皮葡萄球菌和銅綠假單胞菌的熒光強度(n=3)。(b)在不存在和存在青霉素(n=3)的情況下,與TPE-Cep探針孵育后捕獲的大腸桿菌/pUC19和大腸桿菌的熒光強度(104和105 CFU/mL)。(c)與不同濃度的大腸桿菌/pUC19孵育后,再用TPE-Cep探針(n=3)處理后,纖維氈的熒光光譜和強度(d)。(e)在手持紫外線燈的照射下,在365 nm處以不同濃度大腸桿菌/ pUC19存在的纖維氈色帶。(f)經不同周期TPE-CEP處理后,纖維上捕獲的細菌熒光強度(n=3)。
圖6.(a)在捕獲的大腸桿菌/pUC19、TPE-Cep探針以及混合物存在的情況下,DCFH-DA在黑暗和光照下的熒光光譜。(b)在捕獲的細菌、TPE-Cep探針以及混合物存在的情況下,DCFH-DA在黑暗和室溫下與104和105 CFU/mL的大腸桿菌/pUC19孵育后的熒光強度(n=3) 。(c)捕獲的大腸桿菌/pUC19在黑暗中和(d)在光照射下與TPE-Cep探針孵育后的SEM圖像。