負載P物質的電紡小腸粘膜下層/聚（ε-己內酯）-聚（L-丙交酯）片可通過MSC募集促進傷

DOI: 10.1039/c9tb01532a

在這項工作中，我們制備了一種電紡小腸粘膜下層/聚（ε-己內酯）-聚（L-丙交酯）（SIS/PCLA）片，將P物質（SP）負載到該片上，并通過動員人間充質干細胞（hMSCs）作為無細胞支架用于傷口愈合。由于SP的初始爆發，載SP支架的SP釋放量在12h時為42%，在24h時為51%，但1天后呈線性的釋放曲線，并以持續速率釋放21天。與PCLA和SIS/PCLA片相比，SP負載的SIS/PCLA片在體外和體內表現出更高的人間充質干細胞遷移率。募集到的人間充質干細胞的CD44和CD29標記證實，與SPLA和SIS/PCLA片相比，在有SP負載的SIS/PCLA片的情況下，注入小鼠模型尾靜脈的大型人間充質干細胞向傷口遷移的程度更大。在動物傷口模型中，與PCLA（B74%）和SIS/PCLA（B84%）組相比，用SP負載SIS/PCLA片處理組在3周時的傷口收縮率（B97%）顯著升高。此外，與PCLA和SIS/PCLA組相比，SP負載的SIS/PCLA組動物在3周時成熟肉芽組織中顯示出顯著的表皮再生和膠原密度（56%）。SP負載的SIS/PCLA片處理后創面早期也顯示出高血管生成，從而促進創面愈合。此外，SP負載的SIS/PCLA組的巨噬細胞計數（2.9%）低于PCLA組（7.7%）和SIS/PCLA組（3.4%）。由此證實，以SP負載的SIS/PCLA片作為無細胞支架，可以通過MSC募集有效地促進MSC的修復。

圖1.（a）制備電紡SIS/PCLA片和負載SP的SIS/PCLA片的示意圖，（b）負載SP的SIS/PCLA片的活性，以及（c）由負載SP的SIS/PCLA片誘導的愈合過程。（圖像由M. J. K.和M. S. K.使用Adobe Photoshop 7.0繪制。）

圖2.（a）PCLA、SIS/PCLA和負載SP的SIS/PCLA片的攝影圖像，（b和c）掃描電鏡圖像（放大倍數：（b）1300和（c）3000）和（d）接觸角，以及（e）負載SP的SIS/PCLA片在21天內的體外釋放。

圖3.10天內人間充質干細胞向對照、PCLA、SIS/PCLA和負載SP的SIS/PCLA片樣品中的底部腔室遷移（^*p＜0.01，^**p＜0.05）。（上圖由M.J.K.和M.S.K.使用Adobe Photoshop 7.0繪制。）

圖4.（a）10天內人間充質干細胞體外遷移的掃描電鏡圖像，（b）熒光圖像，（c）PKH67標記的人間充質干細胞在PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA片上的PKH67陽性強度。

圖5.（a）用SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA片處理的傷口圖片，（b）ICG標記的人間充質干細胞在10天內向SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA遷移的體內近紅外成像，以及（c）通過在每個時間點從（b）獲得的體內近紅外成像確定的信噪比（SBR）。

圖6.（a）未經處理、PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA片處理7天期間的CD44和（c）CD29染色的組織學圖像，以及（b）CD44和（d）CD29陽性比率（^*p＜0.01和^**p＜0.05）。

圖7.（a）未經處理、PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA片組在3周期間的的傷口圖像和（b）傷口愈合率（％）。

圖8.正常、未經處理、PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA組的H＆E染色的組織學圖像。

圖9.（a）正常、未經處理、PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA組在3周期間的Masson三色染色的組織學圖像和（b）膠原蛋白密度。

圖10.（a）未經處理、PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA組在3周期間的CD31染色的組織學圖像和（b）CD31陽性比率（^*p＜ 0.01，和 ^**p＜ 0.05）。

圖11.（a）未經處理、PCLA、SIS/PCLA和SP負載的SIS/PCLA組在3周期間的ED1染色的組織學圖像和(b)ED1陽性比率（^*p＜0.01，和 ^**p＜0.05）。