DOI:10.1016/j.ijbiomac.2020.06.045
應用生物大分子如絲素蛋白(SF)作為角膜組織工程材料具有廣闊的應用前景。然而,設計合適的組織樣結構以彌補傳統途徑的不足仍然是一項挑戰。SF除了具有生物相容性和透明性外,作為生物材料還應具有機械強度。在本研究中,通過靜電紡絲技術制備了由聚己內酯(PCL)-絲素蛋白(SF)組成的雜化支架。所制備的定向和非定向PCL-SF支架具有不同的重量比。結果表明,SF的添加產生了具有更均勻和定向結構的支架。定向和非定向PCL-SF(60:40和50:50)纖維的極限拉伸強度和楊氏模量在角膜應用中處于可接受的范圍。值得注意的是,定向PCL-SF(60:40和50:50)支架比其他支架具有更高的透明度、親水性、吸水性和體外降解率。細胞相容性結果表明,人基質角膜細胞在定向和非定向PCL-SF支架上附著并增殖。總體結果表明,PCL-SF(60:40和50:50)支架具有促進人類角膜基質再生的巨大潛力。
圖1.定向PCL(A和E)、PCL-SF(70:30)(B和F)、PCL-SF(60:40)(C和G)、PCL-SF(50:50)(D和H)的SEM顯微照片和平均纖維直徑;非定向PCL(I和M)、PCL-SF(70:30)(J和N)、PCL-SF(60:40)(K和O)、PCL-SF(50:50)(L和P)的SEM顯微照片和平均纖維直徑。
圖2.定向PCL(A和E)、PCL-SF(70:30)(B和F)、PCL-SF(60:40)(C和G)、PCL-SF(50:50)(D和H)的取向評估。
圖3.定向(A)和非定向(B)聚電紡支架的應變-應力曲線。
圖4.與定向和非定向PCL和PCL-SF支架的透光率有關的數碼照片(A),定向和非定向PCL和PCL-SF支架在不同波長下的透明度測試(B)。
圖5.定向和非定向PCL和PCL-SF支架的平均接觸角測量值。
圖6.PCL(A)、PCL-SF(70:30)(B)、PCL-SF(60:40)(C)、PCL-SF(50:50)(D)的FTIR光譜。
圖7.PCL和PCL-SF支架的吸水率(A)和體外降解率(B)。
圖8.hSKCs的倒置顯微鏡圖像(A)(100x),在PCL-SF支架上共培養的人基質角膜細胞的核型分析(B)。流式細胞儀分析hSKCs的表面標記物CD34、CD73、CD105、CD90和CD31(C)。紅色陰影表示圖表的負區,藍色陰影表示正區。
圖9.在定向和非定向PCL和PCL-SF支架上,人類角膜細胞的生存力長達3天;*P<0.05,**P<0.001,***P<0.0001。
圖10.3天后在定向PCL(A)、PCL-SF(70:30)(B)、PCL-SF(60:40)(C)和PCL-SF(50:50)(D)以及非定向PCL(E)、PCL-SF(70:30)(F)、PCL-SF(60:40)(G)、PCL-SF(50:50)(H)上的人基質角膜細胞的SEM顯微照片。
圖11.hSKCs在定向PCL(A)、PCL-SF(70:30)(B)、PCL-SF(60:40)(C)和PCL-SF(50:50)(D)以及非定向PCL(E)、PCL-SF(70:30)(F)、PCL-SF(60:40)(G)、PCL-SF(50:50)(H)上培養第三天的熒光圖像(藍色:核)。比例尺=50μm