DOI: 10.1002/jbm.a.36957
在這項研究中，檢驗了水飛薊素和培養有人沃頓膠體（HWJMSC）間充質干細胞的聚乳酸/碳納米管（PLA/CNT）電紡支架治愈大鼠顱骨關鍵性缺損的能力。在這項研究中，將20只成年雄性Wistar大鼠分為四組，每組五只。在全身麻醉的情況下，大鼠的顱骨中產生了8 mm的缺損。然后，將研究組分別定義為不治療組、僅支架組、支架和HWJMSCs組以及支架/細胞加口服水飛薊素組。使用H＆E染色和戈德納-馬森三色染色作為特異性染色進行組織形態計量學研究。這項研究的結果表明，電紡PLA/CNT支架是一種生物相容性支架，HWJMSCs可以在該支架上大量附著并增殖，并且支架本身也是改善骨修復過程的合適選擇。組織形態計量學分析的結果還顯示，與單獨的支架和細胞組相比，支架/細胞和水飛薊素組中新骨形成量明顯更高（p<0.05）。利用水飛薊素和在PLA/CNT支架上培養的HWJMSCs可作為成骨和骨修復過程的合適方法。
圖1：圖像是由電子顯微鏡拍攝的。A：放大倍數為200μm的無細胞PLA/CNT支架，B：放大倍數為20 μm的無細胞PLA/CNT支架，C：放大倍數為20μm的無細胞PLA/CNT支架的纖維存在明顯的孔，D：48小時后在支架PLA/CNT上培養的HWJMSCs。
圖2：通過倒置顯微鏡對HWJSCs的形態學研究。A：HWJSCs的表觀形態，密度約為60％；B：HWJSCs第3通道的表觀形態，密度約為90％。20倍放大拍攝。
圖3：在PLA/CNT支架上培養的吖啶橙和溴化乙錠染色細胞的圖像。A：在PLA/CNT支架上培養的HWJMSCs用濃度為100μg/ml的吖啶橙/溴化乙錠染色，（10倍放大），B：在支架上培養的HWJMSCs細胞用濃度為1000μg/ml的DAPI染色（以20倍放大），C：孵育后48小時，在PLA/CNT支架上檢測溴化乙錠染料標記的HWJMSCs細胞的結果，通過熒光顯微鏡成像（以20倍放大）。
圖4：通過MTT法測定在PLA/CNT電紡支架上培養的HWJMSCs的活力分析圖。在培養后的第1天和第3天，甲酰胺的光吸收是測量和比較二維（作為對照）和3D培養（在支架上）中細胞活力的一個因素，每個實驗至少重復3次。不平衡字母表示在p≤0.05時存在顯著性。
圖5：不同組中堿性磷酸酶的活性圖。A組：對照組，B組：單獨的支架組，C組：支架組加細胞，D組：支架組加細胞和水飛薊素。非連續字母表示在p<0.05的置信水平上存在顯著性差異。
圖6：蘇木精-伊紅染色組1：對照組，組2：單獨的支架組，組3：支架組加細胞，組4：支架組加細胞和水飛薊素。A：縮放40倍，B：縮放100倍，C：縮放400倍，D：縮放400倍。黑色矩形：一個選定的區域，需要進一步放大；紅色矩形：在D部分中以更高的放大倍數顯示了支架位置；*：支架，黃色星星：新骨，紅色新月形：開始愈合的病變位置。
圖7：治療后8周，不同組中平均新骨礦化的比較圖。A：對照組，B：支架組，C：細胞加支架組，D：支架加細胞和水飛薊素組。平均值由五次重復實驗得出（n=5）。使用方差分析和Tukey檢驗（均值SEM）在P<0.05下進行均值比較。*：表示在p<0.05的置信水平下存在顯著性差異。**：表示在p<0.01的置信水平下存在顯著性差異。***：表示在p<0.001的置信水平下存在顯著性差異。
圖8：戈德納-馬森染色圖像。組1：對照組，組2：單獨的支架組，組3：細胞加支架組，組4：細胞加支架組并口服水飛薊素。A：縮放40倍，B：縮放100倍，C：縮放400倍，D：縮放400倍。黑色矩形：一個選定的區域，需要進一步放大，紅色矩形：在D部分中以更高的放大倍數顯示了支架位置，*：支架，黃色星星：新骨，紅色新月形：開始愈合的病變位置。
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