DOI:10.1016/j.msec.2020.110767
角膜和結膜感染是常見的眼部疾病，有時會引起嚴重的難治性耐藥細菌感染。真菌性角膜炎是導致失明的主要原因，傳統的醫學治療效果不理想。因此，迫切需要開發一種新的治療方法來處理這些病例。在本研究中，研究者開發了銀納米顆粒（AgNPs）及纖維素納米微纖絲（CNF）表面修飾聚乳酸（PLA）電紡納米纖維膜（EFMs）支架，以促進細胞增殖及抗菌應用。極低含量（低于0.1%）的AgNPs易被CNF固定在PLA EFMs表面，使其具有親水性和抗菌性。體外細胞共培養實驗表明，該支架對眼上皮細胞具有良好的生物相容性，尤其是CNF涂層支架，能顯著促進細胞增殖。此外，AgNPs對大腸桿菌（E.coli）和金黃色葡萄球菌（S.aureus）的抑制率均可達95%以上，而且對大多數鐮刀真菌的抑菌活性也很突出。因此，研制的含CNF和AgNPs的PLA EFMs有望成為促進細胞增殖和殺滅感染性病原體的眼用繃帶，在未來的眼部傷口愈合中具有潛在的應用前景。
圖1.電紡納米纖維膜（a和b）PLA、（c和d）PLA-1和（e和f）PLA-2的SEM圖像。電紡納米纖維膜（g）PLA和（h）PLA-2的橫截面圖像。
圖2.電紡納米纖維膜（a）PLA和（b）PLA-2的EDX光譜（插圖指示EDX分析元素的實際位置）。PLA-2的SEM圖像以及（c）C、（d）O和（e）Ag的元素映射圖像。
圖3.電紡納米纖維膜（a）PLA、（b）PLA-1和（c）PLA-2的水接觸角。
圖4.這些PLA電紡納米纖維膜的典型應力-應變曲線（插圖顯示了制備的PLA電紡納米纖維膜的機械性能。）
圖5.（a1～c1）CjECs和（a2～c2）CECs在電紡納米纖維膜上接種48h的掃描電鏡圖像：（a1，a2）PLA、（b1，b2）PLA-1和（c1，c2）PLA-2。
圖6.（a1～a4和b1～b4）CjECs和（c1～c4）CECs在（a1、b1和c1）tcps和PLA EFMs上的表型：（a2～a4）PLA、（b2～b4）PLA-1和（c2～c4）PLA-2。進行了免疫細胞化學分析以顯示結膜和角膜上皮特異性標記物：CK19用于CjECs（a1～a4），MUC5AC用于杯狀細胞（b1～b4），CK12用于CECs（c1～c4）。結膜（d和e）和角膜（f）上皮特異基因表達的qPCR分析。*p<0.05，**p<0.01。
圖7.CjCEs和CECs在（a1～d1）tcps和PLA EFMs上的細胞活力和增殖結果：（a2～a4）PLA、（b2～b4）PLA-1和（c2～c4）PLA-2。電紡納米纖維膜上結膜（a1～a4）和角膜（b1～b4）上皮細胞活（綠）/死（紅）染色。tcps和EFMs上細胞BrdU染色（c1～c4和d1～d4）。CCK-8對電紡納米纖維膜（g和h）上細胞增殖的分析。（為了解釋本圖例中對顏色的引用，請參閱本文的網頁版本。）
圖8.（a）CjECs和（b）CECs細胞在PLA EFMs上接種3天的IL-6基因表達的qPCR分析。
圖9.免疫細胞化學顯示CjECs在（a1）tcps和PLA EFMs上的P63免疫染色：（a2）PLA、（a3）PLA-1和（a4）PLA-2。qPCR和蛋白質印跡結果顯示，CjECs在tcps和PLA EFMs（b和c）上的mRNA和蛋白表達水平。體外培養CjECs的組織學分析：（d1）PLA，（d2）PLA-1，（d3）PLA-2。
圖10.在PLA EFMs上孵育后，帶有（a1～a4）金黃色葡萄球菌菌株和（b1～b4）大腸桿菌定植的瓊脂培養基的照片：（a2，b2）PLA、（a3，b3）PLA-1和（a4，b4）PLA-2。（c）PLA EFMs對大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的抗菌活性。在PLA EFMs上孵育后，（d1～d4）鐮刀菌定植的照片：（d2）PLA，（d3）PLA-1，（d4）PLA-2。（e）PLA EFMs對鐮刀菌的抗真菌活性。（數據代表平均值±標準偏差）。
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