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    大氣壓等離子體射流調節生物活性肽與聚己內酯電紡層的偶聯

    2019-12-31   易絲幫

    DOI:10.1016/j.apsusc.2019.144713

    組織再生支架的表面化學性質可以指導細胞的生長。在本研究中,研究者提出了一種新的方法來功能化電紡聚己內酯(PCL)支架,僅需改變一個工藝參數就可以調節生物分子的表面濃度。該方法以氨官能團起始形式(3-氨丙基)三乙氧基硅烷(APTES)為前體,通過新型大氣壓等離子體射流(APPJ)沉積,并通過這些胺與合成的人玻連蛋白粘附提示(HVP)的連續選擇性共價連接。在肽C末端,醛基的加入確保了伯胺和HVP之間通過烷基亞胺脫氧雙取代的選擇性連接。通過這種方法,研究者僅通過改變等離子體工藝的沉積時間就可以改變HVP表面濃度。這導致了等離子體涂層的不同表面覆蓋率,進而導致不同數量的連接HVP。通過紅外光譜、光電子能譜和電子顯微鏡對涂層的穩定性、形貌和覆蓋率進行了評估。作為覆蓋率的函數,總氮法揭示了肽濃度的變化,并通過生物測定證實了這一點,表明人類成骨細胞的生存能力隨肽濃度的增加而增加。

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    圖1.樣品制備過程示意圖。(1)所需形態和厚度的PCL膜的靜電紡絲。(2)用APPJ沉積含氨基的功能涂層,改變前驅體,可選擇其他含不同官能團的涂層。(3)由于合成了帶有醛錨定基的肽,表面可以通過共價鍵進行生物功能化。


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    圖2.HVP-醛結構:FRHRNRKGYXF。7-氨基庚酸(X)充當肽和表面之間的間隔,而最后一個苯基丙胺酸包含特定鍵所需的醛基。


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    圖3.(a)APPJ沉積表面的掃描電鏡圖像:左側為無涂層的PCL纖維,中部為帶有內能和二次電子探測器的樣品PCL10的背面和正面,右側為PCL39的正面。(b)APTES前驅體開始在硅基底上沉積APPJ涂層的SEM截面。(c)在每個樣品超過120根纖維的SEM圖像中手工測量PCL纖維直徑的分布,平均值表示接近底部軸(±100 nm)。


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    圖4.剛沉積后(黑色)和浸入去離子水(紅色)后,APPJ涂層的紅外光譜。(a)在硅基底上的APPJ涂層的FT-IR光譜,以及(b)通過39次掃描(P CL39)沉積在電紡PCL膜上的APPJ涂層的校正ATR光譜。用綠色箭頭指示涂層吸收的范圍:二氧化硅涂層主鏈、氮基和OH帶。


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    圖5.XPS分析。測量PCL1和PCL39表面的光譜。


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    圖6.(左軸-黑色)HVP功能化前后總氮含量的確定與等離子體沉積過程中掃描次數的關系。(右軸-紅色)在培養2小時后使用MTT測試法測定的成骨細胞的生存能力,以未經處理的電紡PCL基底上的細胞生存能力作為參考。數據為三個實驗中的平均值±標準偏差。(** 0.001 與PCL相比,*** 0.0001 與PCL相比)。


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