DOI: 10.1002/adhm.202000604
支架的導電性和排列方式是影響神經修復效果的兩個主要因素。在此,本研究以不同的旋轉速度(0、500、1000和2000rpm)進行靜電紡絲制備了由聚(ε-己內酯)(PCL)和碳納米管(CNTs)組成的具有不同取向度的導電復合纖維,同時充分論證了定向形貌和電刺激對神經再生的協同促進機制。在1000rpm的最佳轉速下,電紡PCL纖維在宏觀(平均偏向角=2.78°)或微觀晶體尺度(取向度=0.73)下呈現出取向結構,接觸角降低為99.2°±4.9°,在垂直和平行于纖維軸的方向上有足夠的拉伸強度(1.13±0.15和5.06±0.98MPa)。為了進一步提高導電性(15.69-178.63 S m-1),將碳納米管引入取向纖維中,這有利于神經細胞體外取向生長和損傷坐骨神經的體內再生。基于強大的細胞誘導行為、最佳的坐骨神經功能指數和增強的髓鞘/軸突再生能力,這種具有優化纖維排列方式的導電PCL/CNTs復合纖維可成為促進基于支架和細胞的神經修復策略的優先選擇。
圖1.不同電紡PCL纖維的形態、取向度和親水性。A)電紡PCL-0、PCL-500、PCL-1000和PCL-2000纖維的SEM形態,B)由取向方向得出的平均偏向角,以及C)水接觸角。所有統計數據均表示為平均值±SD(n=5)。
圖2.不同電紡PCL纖維的力學性能和熱性能。A)在兩個方向上進行力學測試的示意圖。B,D)應力-應變曲線,C,E)在平行和垂直于纖維取向方向上的應力和楊氏模量。F)電紡PCL-0、PCL-500、PCL-1000和PCL-2000纖維的DSC加熱曲線和G)SAXS圖譜。所有統計數據均表示為平均值±SD(n=3;**P<0.01)。
圖3.電紡PCL/CNTs-1000復合纖維的綜合性能。A)電紡PCL/CNTs-1000復合纖維的SEM圖像,B)接觸角,C)應力-應變曲線,以及D)電導率。E)接種在電紡PCL/CNTs-1000復合纖維上的PC-12細胞七天后的整體形態。所有統計數據均表示為平均值±SD(n=3;***P<0.001)。
圖4.坐骨神經橫斷后的功能恢復。A)術后三個月自體移植、PCL/CNTs-1000+ES、PCL/CNTs-0+ES、PCL/CNTs-1000和PCL/CNTs-0組的足跡圖像和B)SFI值。C)大鼠電生理分析中電極放置的示意圖。D)術后三個月誘發CMAP。E,F)術后三個月自體移植、PCL/CNTs-1000+ES、PCL/CNTs-0+ES、PCL/CNTs-1000和PCL/CNTs-0組中CMAP的波幅和潛伏期。所有統計數據均以平均值±SD表示(n=3;*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。
圖5.坐骨神經損傷修復三個月后的組織學變化。A)移植三個月后,自體移植、PCL/CNTs-1000+ES、PCL/CNTs-0+ES、PCL/CNTs-1000和PCL/CNTs-0組的H&E染色,B)TEM圖像,C)髓鞘軸突直徑以及D)再生神經厚度。所有統計數據均表示為平均值±SD(n=3;*P<0.05)。
圖6.術后三個月坐骨神經再生的免疫熒光分析。A)三個月后,自體移植、PCL/CNTs-1000+ES、PCL/CNTs-0+ES、PCL/CNTs-1000和PCL/CNTs-0組的NF200/MBP和B)GFAP/TuJ-1三重免疫熒光常規染色,C-F)再生坐骨神經的半定量熒光密度分析。所有統計數據均以平均值±SD表示(n=3;*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001)。
圖7.GM的再生能力。A)五個組中的GM形狀。(左:未經治療的肌肉組織;右:術后肌肉組織)。B)GM的Masson三色染色,C)自體移植、PCL/CNTs-1000+ES、PCL/CNTs-0+ES、PCL/CNTs-1000和PCL/CNTs-0組中GM的重量百分比,以及D)腓腸肌纖維與肌肉面積之比。所有統計數據均以平均值±SD表示(n=3;*P<0.05,***P<0.001)。