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    Int. J. Biol. Macromol.:PA-SLB核殼納米纖維支架的制備及其用于切除傷口皮膚重建的體內外評估

    2020-12-15   易絲幫

    DOI:10.1016/j.ijbiomac.2020.12.025

    皮膚是人體的保護層,由于創傷、事故、壓力和危險暴露等多種因素,皮膚往往容易受到損傷。這就需要皮膚的自我再生和修復能力,該修復期是一個非常精細的調節過程。為了加速這一過程并防止進一步損傷,敷料是至關重要的。在此,研究者制備了聚-3-羥基丁酸(P)-海藻酸鈉(S)(核-殼)納米纖維基質,作為切除傷口模型中皮膚組織再生的保護性支架。使用同軸靜電紡絲將精氨酸(A)和層狀雙氫氧化物-桿菌肽(LB)摻入納米纖維基質的核和殼中。核殼納米纖維有助于L-精氨酸和桿菌肽的協同受控遞送,分別在傷口部位的蛋白質合成、細胞信號傳導和感染控制中發揮著主要作用。通過對真皮成纖維細胞的測試證實了其體外生物相容性。此外,體內研究表明這兩種成分在傷口的積極愈合中具有協同作用。生化、組織學和免疫組化研究表明,精氨酸負載支架有助于細胞遷移和增殖。上述結果表明,殼、核中桿菌肽-納米粘土復合物和L-精氨酸的同時存在為支架提供了可促進傷口愈合的動態特性。

     

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    圖1.具有不同S:PVA比例的PS納米纖維支架的SEM:(a)3:7,(b)6:4,(c)7:3,(d)PA-SLB納米纖維支架的橫截面SEM圖。


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    圖2.支架的傅立葉變換紅外光譜:精氨酸負載聚(3-羥基丁酸)(核)(PA);海藻酸鈉與LDH-bac(殼)(SLB);PA-SLB:核殼。


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    圖3.支架的孔隙率。***表示經單向ANOVA分析,當P<0.001時差異具有統計學意義。


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    圖4.支架在60小時內的溶脹率。結果表示為平均值±SE。


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    圖5.在30s時電紡支架的水接觸角,顯示了不同支架的水滴變化。


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    圖6.從PA-SLB支架的核-殼組分釋放出精氨酸和桿菌肽的模式。插圖顯示了桿菌肽單獨釋放和LDH-桿菌肽釋放的差異。


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    圖7.所制備的支架對金黃色葡萄球菌的抗菌作用。i-iii顯示培養板照片,以評估微生物培養物與支架相互作用后菌落形成單位的數量。經金黃色葡萄球菌處理支架(PA-SLB)的熒光顯微鏡圖像(放大倍數=10X),顯示活細胞(a,綠色),死細胞(b,紅色)和合并(vi)。


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    圖8.[a]支架對NIH3T3成纖維細胞系活性的影響。所有實驗均一式三份進行,并使用t檢驗分析均值±SE;**P<0.05表示統計學顯著差異,[b]體外熒光顯微鏡圖像顯示培養24小時后的細胞活性,放大倍數為40倍。


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    圖9.顯示了從第0天到第20天以相同距離拍攝的切除傷口愈合模式的照片。


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    圖10.(a)20天的傷口閉合率。(b)在康復期間動物體重的變化。***P<0.001表示顯著性差異。


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    圖11.對照(a,c)和PA-SLB(b,d)處理動物的組織學圖像。對照(e,g)和PA-SLB(f,h)處理動物的Masson三色染色。


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    圖12.用支架PA-S和PA-SLB處理的傷口組織切片的免疫組織化學染色,顯示了VEGF的表達,VEGF是愈合過程中的重要生長因子。


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    圖13.傷口愈合的指標:(a)治療動物組織中羥脯氨酸的水平。(b)治療動物組織中的尿酸水平。(c)治療動物組織中己糖胺的水平。***P<0.001表示顯著性水平。


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    圖14.對照組和治療組離體愈合傷口組織的抗張強度值。與對照組相比,數值表示為平均值±SD,顯著性水平表示為***P<0.001。

     

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