DOI: 10.1039/D0TB00779J
目前應用于周圍神經工程的氧化石墨烯具有一定的局限性,例如細胞毒性和缺乏導電性,這兩者對于調節神經相關細胞的行為至關重要。在這項工作中,研究者通過靜電紡絲設計了還原氧化石墨烯-GelMA-PCL納米纖維神經導管。rGO摻入GelMA/PCL基質中顯著增強了雜化材料的電導率和生物相容性。而且,具有低rGO濃度(0.25和0.5wt%)的雜化納米纖維可以顯著改善雪旺細胞(RSC96)的增殖。更重要的是,rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維可以激活雪旺細胞(RSC96)上皮間質轉化(EMT)相關基因的表達。在體內研究中,rGO/GelMA/PCL神經導管可以促進大鼠的感覺/運動神經再生和功能恢復。將rGO結合到生物相容性納米纖維支架中的復合策略很簡單,但有效地改善了組織工程效果。rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維在周圍神經組織工程中具有巨大的潛力。本研究為電刺激在周圍神經再生中的進一步發展提供了實驗基礎。
圖1.rGO/GelMA/PCL納米纖維的制備示意圖。步驟1:DA的原位聚合將GO轉化為rGO。步驟2:靜電紡絲工藝,GelMA與rGO之間的共價鍵合以及GelMA的自聚合(在紫外線照射下)。(A)GelMA/PCL和DPA使雜化納米纖維具有出色的生物相容性。(B)還原氧化石墨烯形成電通路,并為雜化納米纖維提供了優異的導電性。(C)rGO/GelMA/PCL相互作用的示意圖。
圖2.rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維的表征:(A)-(E)具有不同rGO濃度的rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維的表面形態圖像(A:0wt%rGO,B:0.25wt%rGO,C:0.5wt%rGO,D:0.75wt%rGO,E:1.0wt%rGO。比例尺=20μm。(F)具有不同rGO濃度的rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維的平均直徑(對照:0wt%rGO,0.25rGO:0.25wt%rGO,0.5rGO:0.5wt%rGO,0.75rGO:0.75wt%rGO,1.0rGO:1.0wt%rGO)。*P<0.05。誤差線=s.e.m.n>45。(G)具有不同rGO濃度的rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維的體外降解(對照:0wt%rGO,0.25rGO:0.25wt%rGO,0.5rGO:0.5wt%rGO,0.75rGO:0.75wt%rGO,1.0rGO:1.0wt%rGO)(H)具有不同rGO濃度的rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維的電導率(0.25rGO:0.25wt%rGO,0.5rGO:0.5wt%rGO,0.75rGO:0.75wt%rGO,1.0rGO:1.0wt%rGO)。
圖3.RSC96在具有不同rGO濃度的rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維上的細胞行為(對照:0wt%rGO,0.25rGO:0.25wt%rGO,0.5rGO:0.5wt%rGO)。(A)-(D)在具有不同rGO濃度(A:0.25wt%,B:0.5wt%,C:0.75wt%,D:1.0wt%)的rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維上培養的RSC96的SEM圖像。(E)-(H)培養24、48、72和96小時后的細胞增殖。*P<0.05,#P<0.05。誤差線=s.e.m.n=3。
圖4.在rGO/GelMA/PCL雜化納米纖維支架上培養的雪旺細胞(RSC96)的EMT相關基因表達(對照:0wt%rGO,0.25rGO:0.25wt%rGO,0.5rGO:0.5wt%rGO),在細胞培養板上培養的RSC96作為陰性對照(RSC96)。在RS96組與對照組,0.25rGO或0.5rGO組之間,*P<0.05。在對照組與0.25rGO或0.5rGO組之間,#P<0.05。*P<0.05,#P<0.05。誤差線=s.e.m.n=3。
圖5.行走軌跡分析和電生理學。(A-C)植入12周后,對照組、0.5rGO組、自體移植組和正常組的足印和踏步模式。在0.5rGO組與正常組之間,#P<0.05,誤差線=s.e.m.n=8。(D和E)對照組、0.5rGO組、自體移植組和正常組的CMAP幅度和面積。在坐骨神經近端與遠端之間,*P<0.05。在0.5rGO組和正常組之間,#P<0.05。*P<0.05,#P<0.05。誤差線=s.e.m.n=6。(F)對照組、0.5rGO組、自體移植組和正常組的運動神經傳導速度。*P<0.05,誤差線=s.e.m.n=6。