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    Mater. Sci. Eng. C:無標記型光致發光免疫傳感器,用于聚丙烯腈/氧化鋅納米纖維檢

    2020-08-26   易絲幫

    DOI:10.1016/j.msec.2020.111401

    準確、快速地檢測有害分子、微生物、污染物和毒素目前仍然是一項全球性挑戰。黃曲霉毒素B1(AFB1)是一種有毒有害的真菌產物,對人類和動物具有致癌、致突變和免疫抑制作用。因此,食品和飲料中AFB1的篩查對預防食源性疾病具有重要意義。在本研究中,在具備集成聚丙烯腈/氧化鋅(PAN/ZnO)納米纖維的微流控設備中檢測到AFB1分子,該納米纖維由靜電紡絲和原子層沉積(ALD)技術制備而成。對PAN/ZnO納米纖維進行了結構和光學分析,并將具有最合適特性的樣品用于AFB1檢測。為了獲得對AFB1的生物識別層,分別使用(3-氨基丙基)三乙氧基硅烷(APTES)、戊二醛(GA)、牛血清白蛋白(BSA)和單克隆抗體(抗AFB1)對PAN/ZnO樣品進行了修飾。隨后,將基于光致發光(PL)的免疫傳感器整合到微流體單元中,并進行AFB1檢測。分析了由AFB1和抗AFB1復合物形成引起的PL變化機理。該方法能夠檢測最低濃度(LOD)約39 pg/ml的AFB1,而靈敏度范圍評估為0.1-20 ng/ml。所獲得的LOD和靈敏度值以及檢測方法的簡便性,使該方法具有進一步的應用前景。

     

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    圖1.(a)實驗裝置的照片,其中(1)-帶管的微流體單元;(2)-AFB1樣本;(3)-蠕動泵;(4)-AFB1廢物;(5)-激光;(6),(7)和(8)-鏡子和透鏡系統,(9)-集光器。(b)在PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1結構上基于PL的AFB1檢測的實驗設置方案。


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    圖2.PAN/ZnO納米纖維的SEM圖像:(a-c)不同放大倍數的PAN/ZnO50nm頂視圖;單納米纖維的芯鞘結構(厚度約50nm)(d);PAN/ZnO20nm納米纖維的晶體結構(e-f)。


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    圖3.PAN/ZnO納米纖維的TEM圖像:ZnO層20nm(c,e,f);ZnO層50nm(a,b,d)。


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    圖4.PAN/ZnO納米纖維的XRD光譜(a)和ZnO層厚度為20nm的單納米纖維的EDX映射(b)。


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    圖5.具有不同厚度ZnO層的PAN/ZnO納米纖維的PL光譜(a)和(b)用高斯函數計算出的PL解卷積;插圖-ZnO納米結構中可能的光學躍遷及其能量,其中有自由激子(FE),單電離的氧空位(Vo+),雙電離的氧空位(Vo++)和氧間隙(Oi)。


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    圖6.逐步生物功能化過程(a)和(b)以下生物功能化階段的FTIR光譜:深藍色-PAN/ZnO20nm塊狀樣品;明亮的藍線-PAN/ZnO20nm/APTES;綠色-PAN/ZnO20nm/APTES/GA;紅線-PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1。


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    圖7.達到穩態條件后,在含樣品的不同AFB1濃度(從下到上)中孵育后,PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1生物傳感器的光致發光光譜;(b)在PL峰值位置(λ=565nm)測得的響應曲線。


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    圖8.兩種類型表面修飾的ZnO納米層的能帶圖示意圖:PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1/BSA(a)和PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1/BSA&AFB1(b)。躍遷1是在紫外光照射下電子-空穴對的激發,2-電子到缺陷能級的非輻射躍遷,3是輻射躍遷,即可見區域中的PL,4-空間電荷區域(SCR)中的非輻射躍遷,5'表示電子從表面遷移到ZnO內部,5''表示空穴從內部遷移到ZnO界面。


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    圖9.PL峰值最大值(在λ=565nm時)與AFB1濃度的關系;(b)分析物(AFB1)與PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1結構相互作用的等溫線;(c)計算PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1結構對AFB1的敏感性。


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    圖10.通過熒光共聚焦顯微鏡獲得的圖像:(a)塊狀PAN/ZnO20nm納米纖維(b)和PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1結構。(c)PAN/ZnO20nm/APTES/GA/Anti-AFB1時間分辨PL強度,AFB1的濃度為10 ng/ml。


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