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    Journal of Experimental Nanoscience:PAMAM樹枝狀聚合物修飾絲素蛋白納米纖維支架用于細胞培養

    2020-07-06   易絲幫

    DOI:10.1080/17458080.2020.1788216

    絲素蛋白是一種被廣泛研究用于生物醫學領域的蛋白質。在本研究中,將蠶絲溶解在CaCl2-C2H5OH-H2O中以獲得絲素蛋白(SF)溶液,然后在冷凍干燥機中凍干。對SF海綿的靜電紡絲是在不同的絲素濃度下進行的。通過EDC和NHS,將PAMAM樹枝狀聚合物交聯到羧基封端的絲素蛋白上來修飾SF納米纖維。使用SEM、X射線衍射、FTIR和MTT分析對修飾的SF納米纖維支架進行了評估。SEM顯微照片顯示,含有7%(w/w)絲素蛋白的靜電紡纖維具有連續的纖維,平均直徑為80 nm。經過處理,SF納米纖維從無規卷曲至b-片的構象轉變迅速發生,通過FTIR和X射線衍射證實了這一點。FTIR光譜顯示酰胺峰,這證實了絲素蛋白的存在。修飾分析結果表明,SF納米纖維支架表面的氨基較多。通過將成纖維細胞L929接種在納米纖維上進行生物相容性測試。采用MTT法檢測成纖維細胞的粘附和增殖,未見細胞毒性。因此,絲素蛋白納米纖維支架在組織工程中具有廣闊的應用前景。

     

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    圖1.不同濃度的SF納米纖維的形態:a.5%;b.7%;c.9%;d.11%;e.13%;f.15%。


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    圖2.通過EDC-NHS使SF與PAMAM G2交聯的機理示意圖。


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    圖3.SF納米纖維處理后拍攝的SEM圖像:(a)EDC=5,NHS=2.5,(b)EDC=4,NHS=2,(c)EDC=3,NHS=1.5,(d)EDC=2,NHS=1,(e)EDC=1,NHS=0.5。


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    圖4.針對L-929細胞的MTT分析和細胞毒性研究:(a)孵育24小時期間的細胞存活率(%),(b)與對照材料孵育后的光學顯微鏡圖像,(c)與SF納米纖維支架孵育后的光學顯微鏡圖像。


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    圖5.FTIR透射光譜:(A)脫膠的絲素蛋白,(B)由PAMAM樹枝狀聚合物修飾的絲素蛋白納米纖維支架。


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    圖6.絲素蛋白的X射線衍射圖。(A)純絲素蛋白。(B)用樹枝狀聚合物處理的絲素蛋白。


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