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    Tissue Eng.:PHBV改性的PLLA電紡纖維膜的形狀記憶和成骨能力

    2020-06-20   易絲幫

    DOI: 10.1089/ten.TEA.2020.0086

    左旋聚乳酸(PLLA)作為最著名的可生物降解性聚酯之一,在骨組織工程領域得到了廣泛的研究。如果程序設計得當,PLLA支架也可以被賦予形狀記憶功能。然而,一些值得注意的問題,例如機械脆性、高玻璃化轉變溫度Tg以及相對較差的形狀保持和恢復性能,這就需要對PLLA進行改性以改善其在生理條件下的應用效果。本研究旨在通過靜電紡絲法,結合可生物降解的聚(3-羥基丁酸酯-共-3-羥基戊酸酯)(PHBV)形成超細復合纖維(即PLLA-PHBV),從而對PLLA進行改性。不同質量比(10:0、9:1、8:2、7:3、6:4和0:10)的PLLA-PHBV可以成功地電紡成細度為2-3μm的纖維。PHBV的加入使PLLA-PHBV共混物的Tg降低,楊氏模量增加,同時PHBV的質量比逐漸增加到30%。與未改性的PLLA纖維相比,PLLA-PHBV(7:3)配方具有優異的形狀記憶性能,表現為較高的形狀固定率(>98%)和形狀恢復率(>96%)。此外,即使在非成骨誘導條件下,PLLA-PHBV(7:3)纖維在小鼠骨間充質干細胞中也顯示出增強的成骨誘導能力。總體而言,這項研究首次證明了電紡PLLA-PHBV復合纖維增強的形狀記憶和成骨能力,并且所研究的PLLA-PHBV(7:3)纖維體系有望作為一種多功能支架材料應用于骨組織修復和再生。

     

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    圖1:電紡PLLA-PHBV纖維膜的形態和結構特征。A.SEM圖像,比例尺=10μm,B.直徑測量,C.FTIR光譜,D.X射線衍射圖。


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    圖2:電紡PLLA-PHBV纖維膜的熱性能和拉伸性能。A.DSC曲線,B.由A得出的Tg值,C.37℃時的典型拉伸應力-應變曲線,D.由C得出相應的楊氏模量。


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    圖3:電紡PLLA-PHBV纖維膜的形狀記憶效應。A.對PLLA-PHBV(7:3)和PLLA纖維膜的形狀記憶測試重復7次。B.通過將暫時的直線狀(上圖)或壓縮彈簧狀(下圖)浸入溫水(42℃)中幾秒鐘來宏觀展示形狀記憶能力,從而恢復最初的螺旋狀形狀。


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    圖4:在PLLA和PLLA-PHBV電紡纖維支架上培養長達6天的BMSC的增殖和形態觀察(7:3)。(A-B)在不同的培養時間和接種密度下,通過CCK-8測定的BMSC增殖直方圖(n=6)。(C-D)BMSC擴散的SEM顯微照片和直方圖(n=3),E.BMSC的熒光染色。用鬼筆環肽和DAPI分別染色F-肌動蛋白絲(綠色)和細胞核(藍色)(n=3)(**p<0.01)。


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    圖5:在骨誘導和非骨誘導條件下,在不同支架/基底上培養14天的BMSC的成骨表達。A.ALP染色的代表性圖像。B.ALP活性的定量(n=3)。C.ARS染色的代表性圖像。D.鈣產量的量化(n=3)。E.骨特異性基因編碼Runx2、Alp、ColI和Ocn(n=3)的qRT-PCR分析。(F-G)ColI和OPN蛋白在不同組(n=3)中的代表性免疫熒光圖像,其中ColI和OPN用綠色熒光標記,而細胞核則用藍色熒光染色。NM:正常生長培養基;OM:骨誘導介質(*p<0.05,**p<0.01)。


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