DOI:10.1021/acsbiomaterials.0c00614
口腔念珠菌病是易感人群中非常普遍的口腔疾病，其主要致病菌為白色念珠菌。由于藥物/組織接觸時間較短，以及抗藥性念珠菌菌株的流行率增加，目前的口腔黏膜給藥系統往往是無效的。本研究評估了飽和脂肪酸作為抗真菌劑的功效，并使用瓊脂圓盤擴散法和生物膜測定法研究了新型粘附性電紡口腔補片的遞送效果。無論是在溶液中還是由聚己內酯（PCL）或聚乙烯吡咯烷酮/RS100（PVP/RS100）電紡補片中釋放，辛酸（C8）和壬酸（C9）在圓盤擴散測定中抑制白念珠菌的生長最為有效。相比之下，十二烷酸（C12）對溶液中或通過PCL或PVP/RS100補片釋放的白色念珠菌生物膜表現出最有效的抗真菌活性。游離脂肪酸和補片釋放的飽和脂肪酸均對野生型和耐唑的白色念珠菌菌株顯示出顯著的毒性。這些數據不僅提供證據證明了某些飽和脂肪酸具有用作抗真菌劑的潛力，而且還證明該療法可以使用電紡粘附補片直接遞送至念珠菌感染部位，是一種治療口瘡的新方法。
圖1.DMSO溶液中的飽和脂肪酸范圍從丁酸(C5)到十二烷酸(C12)，以0.2 M的濃度負載到濾盤上，可抑制在瓊脂平板上劃線的白色念珠菌菌株。氟康唑（0.8 mM）和咪康唑圓盤（10μg或2.4 nmol）被用作陽性對照，而DMSO被用作陰性對照。在野生型菌株A）SC5314上，庚酸（C7）、辛酸（C8）和壬酸（C9）具有與氟康唑和咪康唑相似的表面積抑制區，而在患者特異性菌株B）上，CAR17、C7、C8和C9具有更大的抑制區域，而常用的抗真菌藥氟康唑和咪康唑則沒有明顯的抑制區。結果是平均值±SD（n=3）。與DMSO相比，*p＜0.05，**p＜0.01，***p＜0.001。C）與A）和B）中的數據有關的經處理的瓊脂平板的視覺代表性圖像。
圖2.使用代謝XTT分析法測定白色念珠菌SC5314在脂肪酸-庚二酸（C7）和十二烷酸（C12）作用下的生物膜活性，其濃度范圍從400 mM至1.56 mM，如圖A所示。將數據標準化為未經處理的對照（100％生存力），表示為平均值±SD（n=3）。B）表格顯示了白色念珠菌SC5314生物膜上脂肪酸的IC50。C）用C7至C12范圍內的50 mM脂肪酸處理的白色念珠菌SC5314生物膜的活/死圖像分析數據（與所有其他條件相比，C10-C12的p＜0.001，n=5）。D）代表性熒光活（（綠色）/死（紅色）和合成圖像，僅適用于條件介質，C9和C12用于生物膜。比例尺=50μm。
圖3.PCL和PVP RS100電紡補片的代表性掃描電子顯微鏡圖像，該補片不含脂肪酸（安慰劑）或壬酸（C9）或十二酸（C12）。右下角的比例尺適用于所有圖像。
圖4.A）含有壬酸（C9）和十二烷酸（C12）的PCL和PVP R100纖維對白色念珠菌（SC5314菌株）在劃線瓊脂平板上的抑制表面積與安慰劑對照組相比有顯著差異。結果為平均值±SD（n=3）。將上述SD條上方的p值與PCL或PVP RS100安慰劑補片進行比較，并比較具有相同脂肪酸的PCL和PVP RS100補片。**p＜0.01，***p＜0.001。B）瓊脂盤擴散板的代表性圖像。C）顯示了從白色念珠菌劃線的瓊脂板上取下的電紡補片的代表性掃描電子顯微鏡圖像；沿著纖維的圓形是念珠菌細胞，存在于所有PCL補片中，即使含有C9和C12，但僅存在于PVP/RS100安慰劑補片中。比例尺=20μm。
圖5.負載壬酸（C9）和十二酸（C12）的PCL和PVP/RS100電紡補片會降低SC5314和CAR17白色念珠菌生物膜的活力。條件如下：A）SC5314生物膜和B）CAR17生物膜上的PCL補片，C）SC5314生物膜和D）CAR17生物膜上的PVP/RS100補片。結果為平均值±SD（n=3）。與安慰劑電紡補片相比，*p＜0.05，**p＜0.01。
